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4、

铝在土壤中常以铝酸盐的形式存在,可造成土壤酸化而影响植物生长。铝能抑制植物根尖细胞的分裂,破坏根组织。某植物甲的根毛细胞的细胞膜上存在苹果酸通道蛋白(ALMT),该通道蛋白能将苹果酸转运到细胞外来缓解铝毒。可将控制ALMT的基因导入不耐铝的植物中,最终获得耐铝植物。请回答下列问题:

(1)下表是运载体上出现的几种限制酶的识别序列及切割位点。用表中的限制酶切割DNA后能形成相同黏性末端的是_____。

限制酶

识别序列和切割位点

EcoR I

G1AATTC

BamH I

G1GATCC

HindIII

A1AGCTT

Xho I

C1TCGAG

Nde I

CA1TATG

Sal I

G1TCGAC

(2)欲获得ALMT基因的cDNA,科研人员从_______细胞中获取总mRNA,在相应酶作用下获得多种cDNA,再利用ALMT基因制作出特异性________,通过PCR方法得到ALMT基因的cDNA。

(3)启动子是_______识别并结合的位点,能调控目的基因的表达。ALMT基因的启动子有两种类型,其中α启动子能使ALMT基因在酸性土壤的诱导下表达,β启动子能使ALMT基因高效表达而无需酸性诱导。在获得转ALMT基因耐铝植物时应使用_______启动子,不使用另外一种启动子的原因是_____________________。

(4)科研人员采用农杆菌转化法,首先将ALM基因导入植物细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上,再通过_____技术成功获得了耐铝植株。若将一株耐铝植株与普通植株杂交,得到的后代中耐铝植株:普通植株约为3:1,则可判断这株耐铝植株细胞至少转入了_____个ALMT基因,转入的基因在染色体上的位置关系是:______;若使这株耐铝植株自交,后代中耐铝植株:普通植株约为_______。

题型:综合题 难度:较难

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