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题型:综合题 难度:一般

2、

某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后,尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验。通过查阅资料,制订了以下的实验方案:

(实验课题)酵母RNA的提取和鉴定。

(实验目的)1.从酵母中提取RNA;2.鉴定RNA。

(实验原理)微生物是工业上大量生产RNA的原料,其中以酵母尤为理想,因为酵母核酸中主要是RNA,DNA很少,菌体易收集,RNA易分离。RNA不溶于乙醇和无水乙醚,RNA热稳定性较蛋白质强。利用稀碱法(稀碱能使细胞壁溶解)或高盐法(高浓度的盐改变细胞膜的通透性)来释放RNA。RNA水解液(加硫酸、加热)+苔黑酚-FeCl3试剂加热直到沸腾1分钟,会呈现墨绿色。

(实验材料)干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等;0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl3试剂等。

(实验步骤)

①称6克干酵母

②加0.2%氢氧化钠45mL,沸水加热20分钟,搅拌,后加乙酸7滴

③离心10分钟后取上清液

④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟

⑤离心后先用95%乙醇洗两次,再用无水乙醚洗两次

⑥获得RNA粗制品

⑦RNA鉴定

请根据实验方案,思考并回答下列问题:

(1)酵母菌细胞中的RNA主要分布在____中,酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料,理由是____。

(2)实验步骤⑤中,离心后取____(填“上清液”或“沉淀物”)用乙醇、无水乙醚进行洗涤。

(3)RNA提取过程要注意温度的控制,在20~70℃的温度范围内停留的时间不能太长,其原因是____;

(4)稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的,一是____,二是____,以便获得更多更纯净的RNA。

(5)若用花椰菜来提取DNA,可用____瓦解细胞膜,然后充分研磨,实验中研磨速度要____。

题型:综合题 难度:一般

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